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小鼠破骨細胞培養的污染原因及其預防

更新時(shí)間:2022-10-13點(diǎn)擊次數:1101
  小鼠破骨細胞進(jìn)行培養過(guò)程中的威脅就是細胞污染,凡是混入細胞培養環(huán)境中,對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應視為污染。細胞一旦遭到污染,所有的實(shí)驗結果都會(huì )變得毫無(wú)意義。因此,及時(shí)檢測并鑒定出所培養的細胞是否被污染至關(guān)重要。
  
  細胞培養實(shí)驗室要求保持無(wú)菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。細胞培養室要相對封閉,潔凈無(wú)塵,設有緩沖間。
  
  對實(shí)驗室進(jìn)行定期清掃、紫外消毒是避免細胞培養過(guò)程中由于實(shí)驗室環(huán)境引起細胞污染的主要措施,此外,實(shí)驗室內不要放太多雜物,保持實(shí)驗室干燥,有利于降低因實(shí)驗室條件引起的細胞污染率。
  
  小鼠破骨細胞培養過(guò)程中實(shí)驗人員是否操作規范,是否嚴格遵守無(wú)菌工作流程,是細胞污染的一個(gè)主要因素。操作人員進(jìn)培養室前,必須先洗手,在緩沖間換穿專(zhuān)用實(shí)驗服和拖鞋,嚴禁在實(shí)驗進(jìn)行時(shí)頻繁出入培養室。實(shí)驗后應將實(shí)驗產(chǎn)生的廢物和廢液及時(shí)清理出培養室,并清潔無(wú)菌工作臺。
  
  細菌和真菌污染很容易被檢測,因為受到細菌、真菌污染的細胞,培養過(guò)程中培養基會(huì )出現肉眼可見(jiàn)的明顯特征。細菌污染會(huì )導致培養基出現渾濁、顏色改變以及pH值急劇變化,受污染的貼壁細胞在幾天內會(huì )逐漸脫壁死亡。真菌污染后的細胞生長(cháng)速度變慢,培養基中會(huì )漂浮白色、淺黃色或黑色的小點(diǎn)。
  
  因此,通過(guò)觀(guān)察培養基的顏色、漂浮物、pH值或在顯微鏡下觀(guān)察小鼠破骨細胞及其生長(cháng)狀態(tài),從而能初步判斷該細胞是否受細菌、真菌污染。
  
  也可以使用培養檢測法:將細胞培養物在各類(lèi)培養基中適溫培養若干天后,觀(guān)察是否有細菌或真菌生長(cháng)。
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